Среды для выделения микобактерии туберкулеза

Для посева лучше применять свежие приготовленные яичные среды (2-3-недельной давности), но при условии хранения питательной среды в холодильнике или в туго завязанных целофановых пакетах ею можно пользоваться в сроки до 3 месяцев (С. В. Мкртчян, 1970). Если расход среды небольшой, следует готовить половинную порцию. Из полной порции (10 яиц) обычно получается 150-160 пробирок среды. Устанавливают (с помощью едкого натра) рН 7,2 и добавляют 2 г агара, затем в течение часа прогревают на водяной бане, при этом среду многократно взбалтывают. В пробирки разливают по 0,5 мг инактивированной бычьей сыворотки и помещают в водяную баню при 50°. Вместо бычьей сыворотки можно использовать сыворотку крови человека, кролика, морской свинки. В пробирки с сывороткой добавляют по 4 мл среды, которую подогревают до 50°. Покачиванием пробирок перемешивают сыворотку со средой. Среда должна быть прозрачной. Для приготовления кровяной среды пользуются цнтратной кровью, которая служит для целей переливания, но обязательно приготовленной без добавления антисептических веществ. Цитратную кровь непосредственно перед посевом разводят дистиллированной водой 1:3, разливают по 3 мл в стерильные пробирки, в которые добавляют раствор пенициллина: 20 единиц на 1 мл среды. Примерная схема разведения пенициллина: 200 000 ЕД пенициллина растворяют в 10 мл дистиллированной воды, этот основной раствор может в течение 7-8 дней храниться в холодильнике; из него перед посевом готовят второе разведение — 0,1 мл основного раствора +9,9 мл дистиллированной воды и этот последний в количестве 0,3 мл добавляют в каждую пробирку с 3 мл кровяной среды. Соли в указанном порядке добавляют в дистиллированную воду при легком подогревании на водяной бане.

ВАШ КОММЕНТАРИЙ: