Среда кровяная

Каждый ингредиент добавляют после того, как растворится предыдущий. Среду фильтруют через бумажный фильтр и разливают в бутылочки, рН не корригируют (обычно получается 7,2-7,0). Стерилизуют в автоклаве 30 минут при 120°. В таком виде среда может храниться месяцами. Для посева среду разливают в пробирки по 2 мл и снова автоклавируют. Непосредственно перед посевом в каждую пробирку добавляют (из расчета 10% содержания) по 0,2 мл плазмы (снятой с нитратной человеческой крови) или нативной бычьей сыворотки и раствор пенициллина из расчета 10-20 ЕД на 1мл (см. выше). Для определения лекарственной устойчивости применяют эту же среду, но без глицерина. Основной раствор среды фильтруют через бумажный фильтр, устанавливают рН 6,8, стерилизуют при 0,5 атмосферы 30 минут. В охлажденную среду добавляют сыворотку и среду разливают в стерильные пробирки по 5 мл. Картофель тщательно моют щеткой в водопроводной воде, прокаленным ножом срезают кусочки цилиндрической формы высотой 5-6 см, каждый из которых разрезают по диагонали на 2, получая кусочки со скошенной поверхностью. Эти кусочки картофеля погружают в дистиллированную воду, а затем в 5% глицериновую воду на 1-2 часа. В стерильные пробирки наливают (до перетяжки) 5% раствор глицерина (рН 7,0-7,2) и кладут по кусочку картофеля так, чтобы его нижняя поверхность касалась жидкости. Среду стерилизуют в автоклаве, давление в котором доводят до 1,5 атмосферы, после чего подогрев сразу же выключают и пар медленно выпускают. Пробирки вынимают из автоклава, когда давление снизится до нуля. Для контроля стерильности среда помещается на 3 суток в термостат в полунаклонном положении. Нагревают в течение нескольких минут для лучшего растворения пептона и соли, фильтруют через бумажный фильтр. Раствор должен быть прозрачным.