Определение типа микобактерий

В пробирку с культурой добавляют 1 мл 1% раствора цианистого калия и 2 мл 5% раствора хлорамина Б; пробирки встряхивают и кладут так, чтобы жидкость покрыла всю выросшую культуру. При положительной пробе появляется желтое окрашивание, при отрицательной — цвет жидкости не меняется. Так как одним из применяемых реактивов является раствор цианистого калия, то выполнение ниацинового теста требует большой осторожности. Право доступа к работе с цианистым калием имеют хорошо проинструктированные лица. Во время опыта в помещении должно присутствовать не менее двух человек; присутствие при этом посторонних категорически запрещается. Все манипуляции должны проводиться в вытяжном шкафу. После окончания опыта в каждую пробирку обязательно наливают по 3-5 мл 10% раствора NaH4OH или 10% раствора NaOH для обезвреживания цианистого калия. Так же обезвреживается и оставшийся после опыта раствор цианистого калия. Сохранять рабочие растворы цианистого калия на последующие дни категорически запрещается. Учет расхода цианистого калия поручают специально выделенному лицу. Регистрацию проводят в журнале, где указывают даты получения и количество цианистого калия, а также его выдачи для исследований. В комплексе дифференциально-диагностических тестов можно использовать определение никатинамидазной активности, которая катализирует диаминацию никатинамида в никатиновую кислоту с освобождением аммиака, определяемого по Russel. Готовят суспензию проверяемой культуры из расчета 20 мг/мл. К 0,5 мл бактериальной суспензии добавляют 0,5 мл раствора иикатинамида, приготовленного из расчета 200 мкг/мл. Смесь помещается в термостат на 6- 7 часов, после чего определяют выделившийся аммиак. Наличие аммиака определяется по появлению сине-зеленого окрашивания, что дифференцирует испытуемую культуру, как относящуюся к человеческому типу.

ВАШ КОММЕНТАРИЙ: