Глубинные методы посева

Посев на синтетические и полусинтетические среды (с плазмой крови донора или сывороткой бычьей крови) (Школьниковой, Сотона, Проскаура и Бека и др.) производят либо без предварительной обработки материала (серозные пунктаты, спинномозговая жидкость) после длительного его центрифугирования, либо после обработки 2% раствором серной кислоты с последующим отмыванием полученного центрифугата стерильной дистиллированной водой (мокрота, гной и т. п.). В том и другом случае материал засевают в глубину питательной среды (Е. А. Школьникова, 1948) пипеткой (жидкость) или петлей (плотный осадок). Серозные пунктаты можно засевать без добавления к питательной среде плазмы или сыворотки. Посев производят на 3 пробирки. Все пробирки с посевами на жидкие среды парафинируют или закрывают резиновыми пробками, как это описано выше для плотных сред. Первую пробирку вынимают из термостата на 10-й день и до приготовления мазков пробирки с содержимым стерилизуют, так как во время их приготовления может произойти рассеивание микобактерий, что представляет опасность для окружающих. Стерилизуют пробирки в кипящей водяной бане 20-30 минут либо текучим паром 15-20 минут. После стерилизации содержимое пробирок центрифугируют (в этих же пробирках), из осадка приготовляют мазки, которые хорошо высушивают на воздухе, фиксируют над пламенем и окрашивают по Цилю — Нильсену. Ответ получают лишь после микроскопического исследования. В положительных случаях в мазках обнаруживаются микроколонии в виде кос и жгутов. Микобактерий S-формы образуют в жидких средах равномерный диффузный рост. К 15-30-му дню может появиться рост микобактерии, видимый невооруженным глазом: 1) придонный (в виде мелких крупинок на дне пробирки с прозрачной средой) или 2) поверхностный — в виде очень тонкой пленки на поверхности жидкости; среда при этом остается прозрачной. Помутнение среды или появление толстой слизистой пленки, особенно в первые дни после засева материала, свидетельствует о росте посторонних микробов.

ВАШ КОММЕНТАРИЙ: